在酿酒酵母中重构棉子糖生物合成途径的基础研究
周英彪1
田朝玉2
朱玥明2
张娟琨3
孙媛霞2
1.教育部发酵工业微生物重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457;工业酶国家工程实验室,中国科学院天津工业生物技术研究所,天津3003082.工业酶国家工程实验室,中国科学院天津工业生物技术研究所,天津3003083.教育部发酵工业微生物重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457
摘要：研究了在酿酒酵母中重构棉子糖生物合成途径,为后续高效生物合成棉子糖细胞工厂的构建奠定基础.敲除酿酒酵母中能降解棉子糖的蔗糖酶与α-半乳糖苷酶的基因构建出El(△suc2::△mell);在此基础上,构建单基因表达拟南芥肌醇半乳糖合成酶基因gols1与gols3及棉子糖合成酶基因sip1与sip5的工程菌株,及构建双基因组合表达(golsnsip1、golsl:sip5、gols3::sip1与gols3::sip5)工程菌株;比较工程菌株代谢产物如肌醇、UDP-半乳糖、肌醇半乳糖、蔗糖及棉子糖等生成情况,验证在酿酒酵母中重构棉子糖生物合成途径的可行性.研究表明,通过共表达外源肌醇半乳糖合成酶及棉子糖合成酶基因,并敲除能降解棉子糖的蔗糖酶与α-半乳糖苷酶的基因,在酿酒酵母中实现了棉子糖生物合成途径的重构;肌醇半乳糖合成酶与棉子糖合成酶基因的不同共表达组合,棉子糖生成量有差异;重构的棉子糖生物合成途经改变了酿酒酵母原始菌株的代谢流量.
关键词：生物合成棉子糖酿酒酵母肌醇半乳糖合成酶棉子糖合成酶
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(863;2013AA102102)国家自然科学基金(31571793)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 121-128,96 )
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