黑曲霉SH-2基因组中注释的7个α-葡萄糖苷酶基因的鉴定与表达分析
杨海燕
潘力
王斌
1.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,5100062.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,5100063.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,510006
摘要:已公布的黑曲霉CBS513.88基因组中注释了7个α-葡萄糖苷酶基因信息,但其中主要高活性基因一直未报道.本文通过同源重组构建了黑曲霉SH-2菌株7个α-葡萄糖苷酶基因的系列多重敲除株.α-葡萄糖苷酶活性测定结果显示仅agdB敲除株的酶活相较于野生株SH-2降低36%,而其余多重敲除株菌株酶活影响较小.以敲除糖化酶、淀粉酶背景的黑曲霉SH-2-3菌株为宿主,分别敲除和过量表达基因agdB及与已报道的黑曲霉α-葡萄糖苷酶基因序列相似度最高的基因agdA,结果显示agdB敲除株生长速度在不含葡萄糖的培养条件下最慢,并随着葡萄糖添加量增加;agdB过量表达株酶活提高到野生型的10倍.本研究结果说明目前黑曲霉SH-2基因组中所注释的7个α-葡萄糖苷酶基因中仅agdB为主要高活性α-葡萄糖苷酶基因(占总体酶活36%),黑曲霉SH-2中α-葡萄糖苷酶基因仍需进一步探索.
关键词:黑曲霉α-葡萄糖苷酶基因敲除基因表达
资助基金:广东省科技计划(2016A050503016)广东省科技计划(S2012030006235)广东省科技计划(2016A010105004)中央高校基本科研业务费专项华南理工大学项目(2015ZP032)中央高校基本科研业务费专项华南理工大学项目(2015ZZ040)
论文发表日期:2017-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 80-86 )
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