传统食品发酵环境宏基因组中酯酶基因的克隆、表达及性质分析
叶茂
邓毛程
刘慧平
李静
1.广东轻工职业技术学院食品与生物技术学院,广东高校特色调味品工程技术开发中心,广东广州5103002.广东轻工职业技术学院食品与生物技术学院,广东高校特色调味品工程技术开发中心,广东广州5103003.广东轻工职业技术学院食品与生物技术学院,广东高校特色调味品工程技术开发中心,广东广州5103004.广东轻工职业技术学院食品与生物技术学院,广东高校特色调味品工程技术开发中心,广东广州510300
摘要：微生物酯酶是一种广泛应用于食品、医药和精细化工等领域的工业化酶.为了丰富酯酶资源,本文通过提取我国传统发酵食品环境样品总基因组DNA,构建宏基因组文库,从中筛选获得一个新的酯酶基因(est 115,该基因全长948 bp,编码316个氨基酸,其蛋白序列同源性分析,表明与来自Pseudomonas lutea的羧酸酯水解酶同源性最高为38％,显示酯酶Est 115属于新的酯酶类.然后构建了est 115基因重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达,经纯化得到重组酯酶Est 115.酶学性质的分析表明,该重组酯酶Est 115对酰基碳链较短的对硝基苯酚酯具有较高的催化活性,最适作用温度为35℃,最适pH值为7.0,在10% 18％NaC1条件下,酶蛋白可保持较高的催化活性,具有良好的耐盐性,提示该酶可以应用在高渗透压食品加工中,是一个新型的极具潜力的酯酶.
关键词：传统食品宏基因组酯酶克隆性质
资助基金：国家自然科学基金(31500102)广东轻工职业技术学院创新强校工程专项资金项目(2A21005)广东轻工职业技术学院创新强校工程专项资金项目(1A20105)广东轻工职业技术学院创新强校工程专项资金项目(1A10605)广东轻工职业技术学院创新强校工程专项资金项目(2A10905)广东轻工职业技术学院创新强校工程专项资金项目(1A20201)广东高校特色调味品工程技术开发中心建设项目(GCZX-B1103)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 66-71 )
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