酪蛋白磷酸肽活性单体分离纯化、固相合成及结构差异研究
刘果1
孙圣伟1
苗建银1
罗珍2
夏祖猛2
刘飞3
郭宝颜1
曹庸1
1.华南农业大学食品学院,广东广州510642;广东省天然活性物工程技术研究中心,广东广州5106422.无限极(中国)有限公司,广东广州,5100003.广州绿萃生物科技有限公司,广东广州,510663
摘要：本文利用反相高效制备液相色谱对酪蛋白磷酸肽(CPPs)进行初步分离,根据色谱图峰形收集得到4个组分,用分析型反相高效液相色谱进一步分离纯化组分F2,得到亚组分P3,低温减压浓缩回收溶剂,冷冻干燥得到CPPs单体P3粉末.通过已知CPPs单体P3的氨基酸序列人工固相化学合成CPPs单体P3,经质谱和高效液相色谱鉴定,合成CPPs单体P3的分子量与天然单体分子量一致且纯度为98.13％.天然与合成CPPs单体P3的液相保留时间一致,相同浓度条件下合成单体的紫外吸收显著高于天然单体,可能与空间结构差异有关.经红外光谱和圆二色光谱分析,天然与合成CPPs单体P3均含有α-螺旋、β-转角、β-折叠和无规卷曲特征结构,主要以β-折叠-反平行式和无规卷曲形式存在,但不同二级结构形式比例存在差异.天然与合成CPPs单体P3的α-螺旋、β-转角和无规则卷曲比例存在显著差异.天然与合成CPPs单体P3浓度从2 mg/mL上升到4 mg/mL时,天然单体P3不同形式二级结构变化较小,主要由α-螺旋和无规则卷曲向β-折叠-反平行式转变,合成单体P3不同形式二级结构变化显著,主要由α-螺旋和β-转角向β-折叠-反平行式和无规则卷曲转变.
关键词：酪蛋白磷酸肽分离纯化合成红外光谱圆二色光谱
资助基金：国家自然科学基金(31601474)广东省自然科学基金(2016A030310442)广东省教育厅科研平台项目(2013gjhz0003)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 110-116 )
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