重组猪圆环病毒2型Cap蛋白在毕赤酵母中的优化表达及疫苗活性研究
王斌
罗时渝
谢景毅
叶燕锐
潘力
1.华南理工大学生物科学与工程学院,广东省发酵与酶工程重点实验室,广东广州 5100062.华南理工大学生物科学与工程学院,广东省发酵与酶工程重点实验室,广东广州 5100063.华南理工大学生物科学与工程学院,广东省发酵与酶工程重点实验室,广东广州 5100064.华南理工大学生物科学与工程学院,广东省发酵与酶工程重点实验室,广东广州 5100065.华南理工大学生物科学与工程学院,广东省发酵与酶工程重点实验室,广东广州 510006
摘要：猪圆环病毒2型 (PCV2) 是引起断奶猪多系统衰竭综合症 (PMWS) 的主要致病原, 在全世界范围内对养猪业造成了巨大的经济损失.猪圆环病毒2型Cap蛋白 (PCV2-Cap) 是制备猪蓝耳病疫苗的主要靶蛋白.针对目前PCV2疫苗生产工艺复杂、成本较高的问题, 本研究利用毕赤酵母表达系统研究PCV2-Cap蛋白的重组表达及疫苗活性, 将PCV2-Cap基因序列去除核定位信号序列 (NLS) 后, 经密码子偏好性优化, 构建重组表达载体, 并转化至毕赤酵母宿主菌X-33, 经Zeocin抗性筛选获得重组菌株.SDS-PAGE和Western blot结果显示Cap蛋白在酵母表达系统中成功表达, 蛋白质大小为26 ku.5 L罐高密度发酵小试, 得到PCV2-Cap蛋白在发酵上清液中的浓度约为0.53 mg/m L, 占总蛋白的23.5％.动物免疫试验显示重组Cap蛋白能刺激机体产生特异性抗体.结果表明, PCV2-Cap基因在毕赤酵母中实现了分泌表达, 为PCV2-Cap毕赤酵母亚单位疫苗的研制提供了数据支持.
关键词：猪圆环病毒2型毕赤酵母重组表达疫苗活性
资助基金：广东省科技计划(2016A050503016)广东省科技计划(2016A010105004)广州市科技计划(201510010191)广东省自然科学基金(2017A030313097)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 51-55 )
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