全细胞SELEX法筛选单增李斯特菌的ssDNA适配体
孙程
徐宝霞
徐珍霞
陈福生
吴仁蔚
1.华中农业大学食品科学与技术学院,湖北武汉,4300702.华中农业大学食品科学与技术学院,湖北武汉,4300703.华中农业大学食品科学与技术学院,湖北武汉,4300704.华中农业大学食品科学与技术学院,湖北武汉,4300705.华中农业大学食品科学与技术学院,湖北武汉,430070
摘要：以单增李斯特菌活细胞为靶标,采用指数富集配基的系统进化技术(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,SELEX)从含40个随机碱基序列的单链DNA(single-stranded DNA,ssDNA)文库中筛选与之特异性结合的适配体.酶联配体吸附法(ELASA)测定筛选过程中次级文库与单增李斯特菌结合力的变化.对筛选得到的适配体进行序列测定,RNA structure软件预测二级结构,ELASA测定适配体与靶标的结合能力和特异性.结果显示,每轮筛选后次级文库与靶标的亲和力增强,特异性适配体逐步得到富集.测序获得23条适配体,其序列同源性不高,但预测的二级结构有些相似,根据二级结构将其分为3个群,分析结果表明二级结构与适配体的亲和力有关.挑选亲和力较强的21号(Lma-21)和35号(Lma-35)适配体能特异性地识别单增李斯特菌.本研究为开发食源性病原菌单增李斯特菌的新型检测试剂提供了基础材料.
关键词：单增李斯特菌ssDNA适配体全细胞SELEX二级结构
资助基金：国家自然科学基金(31201374)中央高校基本科研业务费专项(2662015PY152)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 110-115 )
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