重组普鲁兰酶在枯草芽孢杆菌中的高效表达
王海
叶燕锐
刘欣
王斌
潘力
1.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,5100062.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,5100063.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,5100064.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,5100065.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,510006
摘要：普鲁兰酶可特异性地水解支链淀粉得到直链淀粉,因而在淀粉加工过程中具有重要的应用.本研究从Bacillus naganoensis ATCC 53909基因组中克隆了普鲁兰酶基因ul,并克隆到大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pBE中,构建表达载体pBE-pul.在此基础上,将来源于枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌以及解淀粉芽孢杆菌中的17个高表达基因的启动子分别克隆到表达载体pBE-pul中,并转化至Bacillus subtilis ATCC6051△10,成功构建了十七株含有不同启动子介导普鲁兰酶分泌表达的重组菌株.对重组菌株的分泌表达比较发现,启动子P43和PspovG介导的普鲁兰酶活性明显优于其他启动子,其中PspovG介导的普鲁兰酶活性更高.同时,还使用了启动子PspovG介导N端的108个氨基酸缺失的pul324突变体进行分泌表达.通过对17种启动子的比较和两个普鲁兰酶基因的比较,本研究构建的一株重组菌株的普鲁兰酶的表达更为高效,其活性高达389.85U/mL,后者显著高于现有的相关报道.
关键词：普鲁兰酶启动子分泌表达枯草芽孢杆菌长野芽孢杆菌
资助基金：广东省科技计划(2016A050503016)广东省科技计划(2016A010105004)广东省自然科学基金(2017A030313097)中央高校基本科研业务费专项华南理工大学项目(2015ZP032)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 87-93 )
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