TLL脂肪酶C末端修饰对其底物选择性的调节作用
谭熙钰1
赵泽鑫2
杨博2
王永华1
1.华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州,5106402.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,510006
摘要:本研究以甘油三酯脂肪酶TLL为研究对象,将偏甘油酯脂肪酶AOL的C末端(Y246-H266)与其C末端(I241-P256)替换,获得突变体TLL _CC,并在毕赤酵母X-33中成功地进行了重组表达.乳化橄榄油的水解实验显示,C末端的置换不影响TLL脂肪酶的pH特性,但是TLL_CC的最适反应温度较TLL脂肪酶下降了15℃.这可能意味着长的C末端可以增加酶分子整体的柔性,进而降低其最适反应温度.三油酸甘油酯的水解实验发现,TLL脂肪酶和突变体TLL_CC反应体系中残留的三酯分别为28.31%和48.12%.而酯化合成甘油酯实验显示,TLL_ CC催化的反应体系中TAG生成量仅为野生型的56.67%,但DAG的生成量却相同.上述研究表明,TLLC末端的这种置换明显减弱了TLL脂肪酶水解和合成TAG的能力,但并不影响其合成DAG的能力.这说明C末端的氨基酸替换可能对脂肪酶TLL的底物选择性起到调节作用.
关键词:甘油三酯脂肪酶偏甘油酯脂肪酶底物选择性C末端
资助基金:广东省科技计划(2017A050503001)
论文发表日期:2018-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 21-27 )
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