Paenibacillus puldeungensis LK18普鲁兰酶基因的克隆表达及酶学性质研究
苏红玉
崔堂兵
1.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,5100062.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州,510006
摘要：本研究根据类芽孢杆菌的普鲁兰酶基因的保守区设计兼并引物,从Paenibacilluspuldeungensis LK18中扩增出普鲁兰酶基因(pulA),将其连接至pET-28a(+)载体上,构建出重组表达载体pET-28a(+)-pulA,转入到Escherichia coli BL21(DE3)中,成功地表达了重组普鲁兰酶.结果 表明:该普鲁兰酶基因全长1968bp,编码655个氨基酸.通过Ni柱亲和层析纯化出重组蛋白,测定其比酶活为508.8U/mg,分子量约为76.95ku.该重组酶的最适反应温度为45℃,在35℃～40℃下保温120min后剩余酶活达60％以上;最适作用pH为6.0,在pH 6.0～8.0条件具有较好的稳定性;10 mmol/L的K+和Mg2+对该重组普鲁兰酶有激活作用,而Zn2+、Mn2+、Ni2+、Fe2+、Cu2+、Co2+、Ca2+等对其有不同程度的抑制作用.本研究成功地构建出一株可高效表达普鲁兰酶的重组菌株,具备一定的工业应用价值.
关键词：Paenibacillus puldeungensis普鲁兰酶克隆表达酶学性质
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 107-113,35 )
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