链霉素抗性选育ε-聚赖氨酸高产菌株
李芹
赵俊杰
刘永娟
王靓
毛忠贵
陈旭升
1.工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院,江苏无锡2141222.工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院,江苏无锡2141223.工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院,江苏无锡2141224.工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院,江苏无锡2141225.工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院,江苏无锡2141226.工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院,江苏无锡214122
摘要：基于核糖体工程的育种方法,通过逐级赋予小白链霉菌M-Z18链霉素抗性,以提高产生菌的ε-聚赖氨酸(ε-PL)合成能力.首先,通过筛选低浓度链霉素(1～5 MIC)抗性突变株,将M-Z18的ε-PL的摇瓶产量从1.6提高到2.43 g/L;随后,再次提升菌株的链霉素耐受性(5～10 MIC),进一步增强菌株的ε-PL合成能力;最后,获得一株高产突变菌SS-19,其ε-PL产量和单位菌体合成能力分别为3.13 g/L和0.58 g/g,较出发菌M-Z18分别提高了95.63％和137.61％.研究表明,SS-19的中心碳代谢途径及ε-PL合成相关的关键酶活性有所增加,意味着ε-PL的合成代谢被明显加强.在以葡萄糖为碳源的RSM培养基中,SS-19比前期育种获得的高产菌株表现出更好的ε-PL合成能力.以上结果表明,通过逐步引入高浓度链霉素抗性的筛选方法可有效提升小白链霉菌的ε-PL产量.
关键词：ε-聚赖氨酸核糖体工程低浓度链霉素抗性高浓度链霉素抗性关键酶活性
资助基金：国家自然科学基金(31671846)江苏省自然科学基金(BK20191332)
论文发表日期：2020-03-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 150-158,195 )
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