降糖肽Aglycin的高效表达及活性鉴定
黄敏华
林静莲
王蒙
马毅
王菊芳
1.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州5100062.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州5100063.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州5100064.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州5100065.华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006
摘要：基于自组装肽ELK16能在大肠杆菌细胞内自聚集的特性,本研究将Aglycin通过一个内含肽MxeGyrA与自组装肽连接,构建能在体外自剪切的重组表达载体pET30a-Aglycin-Mxe-PT-ELKl6.将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)并进行蛋白表达条件的优化,得到目的蛋白聚集体,随后对聚集体进行DTT切割条件的优化,经过进一步纯化最终可得到纯度为98.15％、产量为5.53 mg/g菌体湿重的Aglycin肽.采用基因工程手段重组表达Aglycin的产量比目前化学提取方法提高了近100倍.此外,经体外实验证明,Aglycin对α-葡萄糖苷酶抑制的IC50(36.48 trnol/L)比阿卡波糖(991.33 μmol/L)低,说明Aglycin比阿卡波糖有更强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,这进一步证明gglycin有开发为α-葡萄糖苷酶抑制剂的潜力.
关键词：重组表达自组装肽大肠杆菌α-葡萄糖苷酶抑制
资助基金：科技部“863”科技计划项目(2014AA021004)
论文发表日期：2020-04-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 143-149,219 )
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