重组β-淀粉酶在枯草芽孢杆菌中的高效表达及其在糖化反应中的应用
曾君瑞
潘力
王斌
华南理工大学生物科学与工程学院,广东省发酵与酶工程重点实验室,广东广州 510006
摘要：β-淀粉酶(β-amylase,AmyM)是一种重要的工业用酶,广泛应用在啤酒酿造、制糖等行业中.本研究利用Bacillus megatherium DSM 319来源的β-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis ATCC 6051?10)中分泌表达.首先,构建不同单启动子和双启动子介导β-淀粉酶表达的重组菌株,在摇瓶培养条件下,由P43-P43介导的双启动子重组菌株在发酵培养27 h时,分泌β-淀粉酶酶活力最高达2950.76 U/mL;随后研究碳代谢阻遏效应(Carbon Catabolite Repression,CCR)对重组β-淀粉酶表达的影响,发现对分解代谢控制蛋白(Catabolite control protein A,CcpA)在DNA上顺式调控元件的碱基位点进行定点突变,可以有效缓解碳阻遏效应,β-淀粉酶酶活提高到4663.03 U/mL;最后,将重组β-淀粉酶应用在糖化反应过程中,结果表明麦芽糖转化率可以达到57.62％.综上,本研究成功构建出β-淀粉酶在枯草芽孢杆菌中的高效表达体系,为工业化生产β-淀粉酶提供了理论数据支撑.
关键词：β-淀粉酶枯草芽孢杆菌启动子
资助基金：广东省重点领域研发计划项目(2020B020226007)广州市科技计划(202002030207)
论文发表日期：2021-08-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 75-83 )
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