耐酸Bacillus velezensis P7木聚糖酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达及优化
黄雪芹1
左勇2
张强1
徐佳1
杨建飞1
易媛1
1.四川轻化工大学生物工程学院,四川宜宾 6440002.四川轻化工大学生物工程学院,四川宜宾 644000;四川师范大学生命科学学院,四川成都 610101
摘要：为获得适应于酒糟酸性环境的木聚糖酶,将内源微生物耐酸性环境的野生Bacillus velezensis P7木聚糖酶基因克隆到枯草芽孢杆菌WB800中,纯化后通过SDS-PAGE电泳显示出约40 ku的蛋白多肽.为增加枯草芽孢WB800-P7工程菌株在高密度发酵中细胞外分泌木聚糖酶的产量,进行诱导和培养条件优化,用正交试验分析得出温度对产酶影响最大,确定菌株分泌重组蛋白的条件结果表明:最佳诱导条件为OD6000.8、IPTG 1.2 mmol/L,最佳发酵条件为pH 6.0、培养温度35℃、接种量2％、摇床转速160 r/min.在该条件下发酵16 h,经重复验证,酶活力达到4.21 IU,与优化前相比,酶活力提高了64.45％.并探究重组酶的耐受性,结果表明在强酸性到中性条件下(pH 5.0～7.0),其残余酶活力达到初始酶活力的80％以上.试验成功构建了木聚糖酶工程菌并较好表达蛋白,且重组木聚糖酶在酸性条件的耐受性良好.
关键词：克隆枯草芽孢杆菌产酶优化木聚糖酶
资助基金：四川省科技厅重点研发项目(2018NZ0050)固态发酵资源利用四川省重点实验室应用研究项目(2018GTY004)宜宾市科技计划(2018NY009)
论文发表日期：2021-12-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 40-48,32 )
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