微泡菌ALW1重组β-半乳糖苷酶的异源表达和酶学性质
唐桂均1
李鹤宾2
朱艳冰3
姜泽东3
倪辉3
李清彪3
陈艳红3
1.集美大学海洋食品与生物工程学院,福建厦门 3610212.厦门医学院药学系,福建厦门 3610233.集美大学海洋食品与生物工程学院,福建厦门 361021;福建省食品微生物与酶工程重点实验室,厦门市食品生物工程技术研究中心,福建厦门 361021
摘要：β-半乳糖苷酶催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,是乳制品加工中重要的酶.该研究将微泡菌ALW1菌株的β-半乳糖苷酶在大肠杆菌BL21(DE3)中进行异源表达和纯化,研究其酶学性质.结果表明,微泡菌ALW1的β-半乳糖苷酶属于GH1家族,利用Ni-NTA Agarose亲和层析获得的重组β-半乳糖苷酶分子量约为64 ku.重组酶的最适反应温度为30℃,最适pH为4.5.温度低于25℃、pH 4.0～5.0条件下,β-半乳糖苷酶具有良好稳定性.重组β-半乳糖苷酶对DTT、吐温20和吐温80具有良好的耐受性;离子型去垢剂SDS和CTAB存在时,β-半乳糖苷酶几乎丧失活性.重组β-半乳糖苷酶的Km和Vmax分别为10.98 mmol/L和7.48 U/mg.结构模拟显示,微泡菌β-半乳糖苷酶的催化酸/碱残基和亲核残基分别为Glu186和Glu370.该研究为来自微泡菌ALW1的β-半乳糖苷酶在食品领域的应用奠定理论基础.
关键词：微泡菌β-半乳糖苷酶酶学性质分子对接
资助基金：福建省自然科学基金项目(2020J01679)国家自然科学基金(22178142)
论文发表日期：2022-09-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 111-118 )
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