海洋菌株Mitsuaria sp.SH-50产嗜热性壳聚糖酶CsnSH50的酶学性质表征及其应用
卢波斯
崔丹丹
沈宏
华南农业大学资源环境学院,广东广州 510642
摘要：实验室从中国海南滨海虾蟹养殖区泥土样品中筛选到一株高产壳聚糖酶的海洋菌株Mitsuaria sp.SH-50,优化后该菌株产酶时间仅为12 h,产酶活性可达26.6 U/mL.该研究对其胞外壳聚糖酶进行分离纯化和酶学性质表征并进行壳寡糖制备的小试放大试验,以期进一步明确该菌株在壳寡糖生产上的实际意义.结果表明:壳聚糖酶CsnSH50分子量约为41 ku,纯化后CsnSH50比酶活力为7462.50 U/mg,最适反应pH值为4.5,温度为75℃,在pH值2.5～8.5及温度低于50℃条件下稳定性较好.最适条件下,稀释后CsnSH50的最大反应速率Vmax=29.41 U/mL,米氏常数Km=1.71 mg/mL,1 mmol/L的K+、Ca2+、Cu2+、Fe3+、Mn2+对CsnSH50的酶活力有明显正激活效应,10 mmol/L的Mn2+对其正激活效应可达412％.TLC和ESI-MS结果表明:CsnSH50水解壳聚糖的最终产物主要为壳二糖、三糖、四糖.小试放大试验结果显示:制备5％(m/V)壳寡糖溶液时,壳聚糖溶液的初始pH值3.5,温度75℃,水解120 min时壳寡糖产率达到92.1％,产物平均聚合度为10.2.综上,CsnSH50具有酶活性高、热稳定性好、耐酸等特性,同时是一种鲜有报道的嗜热性壳聚糖酶,具有良好的工业应用潜力.
关键词：壳聚糖酶Mitsuaria sp. SH-50分离纯化内切酶
资助基金：广州市科技计划项目(202206010064)国家重点研发计划(2016YFD0200405)
论文发表日期：2023-01-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 50-58 )
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