广式酱油中微生物蛋白组学分析样本的制备
陈聪1
李俊2
温林凤3
徐婷2
张慧婷3
钟梦丽3
林银山3
曹庸3
符姜燕2
刘占2
1.中炬高新技术实业(集团)股份有限公司,广东中山 528400;华南农业大学食品学院,广东省功能食品活性物重点实验室,广东省天然活性物工程技术研究中心, 广东广州 510642;广东美味鲜调味食品有限公司,广东中山 5284002.广东美味鲜调味食品有限公司,广东中山 5284003.华南农业大学食品学院,广东省功能食品活性物重点实验室,广东省天然活性物工程技术研究中心, 广东广州 510642
摘要：广式酱油发酵周期长、微生物种群多样、代谢物复杂,缺乏微生物蛋白组学分析的样本制备方法.该研究通过比较改良的TCA浓缩法和超滤法两种蛋白纯化方法,利用SDS-PAGE凝胶电泳和LTQ Orbitrap Velos Pro ETD质谱检测酱油微生物宏蛋白组样本制备效果.实验结果表明:TCA浓缩法制备的蛋白样品,其SDS-PAGE凝胶图谱有26个清晰条带,比超滤法多13个;两种法所制备的蛋白经胰蛋白酶酶切后的质谱图可分别鉴定到的2495和1682个肽段,说明TCA浓缩法制备的蛋白样品酶切更充分;不同发酵时期(0、60、120 d)的酱油经TCA浓缩法制备的蛋白样品,烷基化、酶切后,通过LTQ Orbitrap Velos Pro ETD质谱检测和Proteome Discoverer 2.5软件分析,可分别鉴定到1035、1104、1046种蛋白质.通过TCA浓缩法制备蛋白组分析样本,操作简便,实验速度快,蛋白质鉴定率高,适用于广式酱油微生物的蛋白质组学的检测分析,为利用蛋白组学分析广式酱油的微生物发酵分子机制打下了一定的基础.
关键词：广式酱油微生物宏蛋白组蛋白制备方法
资助基金：中山市科技局项目(CXTD2020006)
论文发表日期：2023-01-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 69-74 )
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