毕赤酵母PAS_chr4_0427和PAS_chr2-2_0408基因缺失对神经酰胺合成的比较
黄铭1
吴佳欣1
张目2
胡晓清1
1.江南大学生物工程学院,江苏无锡 2141222.广州悦荟化妆品有限公司,广东 广州 510000
摘要：神经酰胺具有维护皮肤屏障、抗炎抗氧化等多种作用,其生物合成具有重要市场前景.目前神经酰胺主要利用酿酒酵母合成,而尚无利用重要工业宿主—巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)合成的报道,该研究系首次通过基因改造P.pastoris GS115合成神经酰胺.通过CRISPR-Cas9技术依次敲除关键基因PAS_chr4_0427和PAS chr2-2_0408,成功构建了GS115-O和GS115-OC两个突变株.与GS115相比,这两个突变株的最大生物量分别下降了17.03％和24.06％,而其神经酰胺的相对含量分别提升了3.80倍和4.75倍.在GS115-O和GS115-OC中合成了67种神经酰胺,包括28种植物神经酰胺,相较于GS115增加了5种;28种神经酰胺的相对含量增幅超过了100倍,最高达到了8 533.98倍.此外,突变株中磷脂酸、甘油二酯、甘油三酯及特别是肌醇磷酸神经酰胺(PI-Cer)的含量显著增加,尤其是PI-Cer的增长幅度最大,这表明脂质代谢发生了显著变化,促进了神经酰胺向复杂鞘脂的转化.该研究表明GS115-O和GS115-OC是极具潜力的神经酰胺生产菌株.
关键词：毕赤酵母神经酰胺CRISPR-Cas9技术超高效合相色谱串联质谱脂质组
资助基金：国家重点研发计划(2021YFC2100900)
论文发表日期：2025-02-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：12( 40-51 )
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