芒果果肉cDNA文库构建及MiCTR1互作蛋白的筛选
袁芳1
王春艳1
李丽2
1.广西民族师范学院生物与食品工程学院,广西崇左 5322002.广西壮族自治区农业科学院农产品加工研究所,广西果蔬贮藏与加工新技术重点实验室,广西南宁 530007
摘要：该文旨在鉴定芒果MiCTR1的互作蛋白,深入探究MiCTR1调控芒果果实后熟过程的分子机理.以'台农1号'芒果为材料,建立芒果果肉的cDNA文库,构建诱饵载体,对其自激活检测后,从文库中筛选与MiCTR1互作的蛋白,并进行回转验证,通过NCBI网站进行序列比对,明确互作蛋白的功能.结果表明:所构建的cDNA初级和次级文库的库容量分别达到了 5.7×106和1.2×107 CFU/mL,重组率100％,插入片段长度为1 000～2 000 bp,诱饵载体pGBKT7-MiCTRI 不存在自激活.从酵母双杂交文库中筛选到21个初始阳性克隆,经回转验证后最终获得20个与MiCTR1互作的蛋白,主要功能涉及遗传代谢,类叶绿素、维生素E的合成,物质的转运,物质代谢,细胞生长,光合作用.综上,该研究构建的芒果果实cDNA文库质量较高,完整性好,酵母双杂交筛库技术鉴定出多个与芒果MiCTR1互作的蛋白,并且解析其生物功能,为探究MiCTR1调控芒果果实后熟的分子机制奠定理论基础.
关键词：芒果果实成熟酵母双杂交MiCTR1蛋白互作
资助基金：国家重点研发计划(2021YFD1600100)国家自然科学基金(3230181455)广西自然科学基金项目(2020GXNSFBA297099)
论文发表日期：2025-05-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 61-67 )
英文信息