人乳铁蛋白在毕赤酵母中的高效分泌表达
张嘉欣
梁书利
华南理工大学生物科学与工程学院,广东 广州 511400
摘要：人乳铁蛋白(rhLf)具有抗微生物活性、抗炎症、抗肿瘤及参与免疫调节等多种生物学活性,在食品、化妆品以及饲料添加剂中具有广阔的应用前景.从乳液中提取乳铁蛋白的成本较高,制约乳铁蛋白的大规模生产及应用,通过构建高产细胞工厂获取rhLf有望解决这一问题.该研究首先对基因表达元件中的启动子信号肽进行优化,人乳铁蛋白表达菌株上清总蛋白从215.00 mg/L提升至849.52 mg/L,表达元件的优化将人乳铁蛋白表达菌株上清总蛋白提高近3倍.进一步,过表达蛋白生产分泌途径相关的促分泌蛋白因子,调节细胞胁迫反应提高rhLf的产量.过表达调控谷胱甘肽氧化还原系统的Yap1和增加氧化耐受的Msn2,平衡酵母细胞生产压力下的氧化还原状态,人乳铁蛋白表达菌株上清总蛋白从849.52 mg/L提升至1 055.68 mg/L.最后,对目的蛋白进行半定量,目的蛋白从34.82 mg/L提升至197.30 mg/L,提高近4.8倍.该研究通过多种组合策略大大提升了人乳铁蛋白表达菌株的蛋白生产能力,并为毕赤酵母高效分泌表达提供指导.
关键词：人乳铁蛋白毕赤酵母促分泌蛋白因子
资助基金：国家自然科学基金(32272276)
论文发表日期：2025-05-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 79-88 )
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