壶瓶碎米荠TRX-y1-1基因鉴定及原核表达
高李龙
李瑶
罗国强
周毅峰
湖北民族大学 生物与食品工程学院,湖北 恩施 445000
摘要：为解析超聚硒植物壶瓶碎米荠(Cardamine hupingshanensis)在硒胁迫下的抗氧化机制,通过生物信息学方法对硫氧还蛋白-y(thioredoxin-y,TRX-y)基因家族进行基因鉴定与分析.结果显示,壶瓶碎米荠TRX-y基因家族共鉴定出 5 个成员,分布在 4 条染色体上,均含保守活性中心"WCGPC"且定位于叶绿体;系统进化显示其与拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtTRX-y聚于组I,ChTRX-y亚型具有特异性基序.硒胁迫表达谱表明,高硒质量浓度(80000 μg/L)显著诱导ChTRX-y1-1 和ChTRX-y1-2 在根(24 h)和叶(9h)中的上调表达,提示其为核心硒响应基因.进一步克隆ChTRX-y1-1 并构建pET28b-ChTRX-y1-1 重组载体,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21 中表达,诱导条件是温度为 25℃、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷物质的量浓度为 0.1 mmol/L、时长为 10 h,成功获得约 59 kDa的高纯度重组蛋白,经超滤浓缩后重组蛋白质量浓度达到 1.26mg/mL.该研究揭示了ChTRX-y1-1 在硒胁迫中的关键作用,并建立其原核表达体系,为深入探究壶瓶碎米荠硒代谢机制提供分子基础.
关键词：壶瓶碎米荠硫氧还蛋白硒胁迫基因鉴定原核表达
分类号：TS225.1(食品工业)
资助基金：国家自然科学基金(32260070)
论文发表日期：2025-12-30
在线出版日期：2025-12-10（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 476-482 )
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