RNAi沉默PRDXⅢ基因表达诱导U251胶质瘤细胞凋亡的实验研究
左书浩1
焦庆芳1
焦保华2
1.河北省石家庄市第一医院神经外科,0500112.河北医科大学第二医院神经外科
摘要：目的 探讨RNAi沉默PRDXⅢ基因表达诱导U251胶质瘤细胞凋亡.方法 设计合成针对PRDXⅢ的siRNA,脂质体介导转染人U251多形胶质母细胞瘤细胞,RT-PCR法检测转染后24 h PRDXⅢmRNA的表达水平,Western-blotting检测转染后48 h PRDXⅢ蛋白的表达水平,筛选出有效的干扰序列;流式细胞仪、DNAladder、PI染色检测转染后48 hU251细胞的凋亡状况,MTT检测转染后48 h U251细胞的生长抑制率.结果 RT-PCR、Western Blotting检测显示空白对照组、空载体组和无关序列组PRDXⅢmRNA表达无明显变化,干扰序列1、3使PRDXⅢmRNA的表达明显降低.DNA ladder显示干扰组出现明显梯形电泳条带,空白对照组、空载体组和无关序列组细胞未见明显梯形电泳条带.PI染色结果显示空白对照组,空载体组和无关序列组细胞未见明显凋亡,而干扰组细胞核的染色质高度浓染,部分细胞核裂解为碎块,符合凋亡形态学的改变.FCM检测结果显示干扰组细胞凋亡率明显高于空白对照组、空载体组、无关序列组(P<0.01).MTT检测干扰组对U251细胞生长的抑制率为44.4%,明显减慢了细胞生长(P<0.01).结论 RNAi技术成功地抑制了U251细胞中PRDXⅢ基因的表达,并诱导U251细胞凋亡,表明PRDXⅢ基因与胶质瘤的凋亡有关,PRDXⅢ基因有可能成为胶质瘤基因治疗的靶基因.
关键词：PRDXⅢ神经胶质瘤RNA干扰U251细胞基因治疗
分类号：R739.41(神经系肿瘤)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 2405-2408 )
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