麻疹H基因克隆及表达条件优化
赵川
刘维华
张双宅
徐保红
赵冬
张弘
1.河北省石家庄市疾病预防控制中心,0500112.河北省石家庄市疾病预防控制中心,0500113.河北省石家庄市疾病预防控制中心,0500114.河北省石家庄市疾病预防控制中心,0500115.河北省石家庄市疾病预防控制中心,0500116.河北省石家庄市疾病预防控制中心,050011
摘要：目的 克隆麻疹H蛋白基因,构建重组表达质粒,诱导表达蛋白.方法 麻疹Edmonston株减毒活疫苗中提取基因组RNA,RT-PCR扩增H基因.用限制性内切酶EcoR I和HindⅢ双酶切H蛋白基因片段和pET30a(+)载体,连接后获得重组质粒MV-H-pET30a(+),转化至BL21(DE3),IPTG诱导表达.结果 RT-PCR扩增片段长度约为1 900 bp,与MV-H基因相符.MV-H-pET30a(+)测序结果显示:MV-H基因对码正确,核苷酸序列符合率达99.7%.SDS-PAGE结果表明,菌体中含有特异性蛋白,大小约为86kD.结论 在pET30a(+)成功克隆麻疹H基因,并有目的 蛋白表达.
关键词：麻疹病毒H基因基因克隆
分类号：R272.2(中医儿科学)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：2( 3208-3209 )
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