携带NT-3和BDNF基因重组慢病毒载体的构建及在脊髓损伤中的意义
蒋婉婷1
李令民2
张旗2
吴静2
姬文晨3
艾红1
1.西安交通大学第一附属医院超声诊断科, 西安市,7100612.陕西省西安市第四医院( 西安交通大学附属广仁医院)超声诊断科3.西安交通大学第一附属医院骨科, 西安市,710061
摘要：目的 构建携带神经营养素3(NT-3)和脑源性神经营养因子(BDNF)基因的重组慢病毒载体及探讨其在脊髓损伤中的意义.方法 利用PCR方法获取NT-3和BDNF基因,将所得目的基因与慢病毒载体(p+LV-CMV-EF1a-green和pLV-CMV-EF1a-RFP)分别进行双切酶后定向重组和连接,其产物转化细菌感受态细胞后,对阳性克隆进行测序和分析比对.质粒载体构建成功后,利用病毒包装体系,转入293T细胞,获得的重组慢病毒液,采用孔稀释法测定病毒滴度.结果 成功获得携带NT-3和BDNF基因的重组慢病毒载体,二者滴度分别为3×107 TU/ml和2×107 TU/ml.结论 成功获得携带NT-3和BDNF基因的重组慢病载体,为后续实验运用重组慢病载体共转染脂肪干细胞奠定基础,进而为治疗脊髓损伤提供给了新思维.
关键词：BDNF基因NT-3基因慢病毒载体
分类号：R651.21(外科学各论)
资助基金：国家自然科学基金(81701896)教育部中央高校基本科研业务费专项(xjj2018jchz03)陕西省自然科学基础研究计划(2018JQ8069)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 507-510 )
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