miR-205靶向调控PLCε抑制膀胱癌T24细胞EMT和迁移的作用机制研究
孙宾1
刘多凤2
陈建华1
1.202150 上海市,上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院泌尿外科2.202150 上海市,上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院超声科
摘要:目的 探讨miR-205调控磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Gepsilon(PLCε)对膀胱癌T24细胞上皮间质转化(EMT)和迁移的影响.方法 qRT-PCR检测miR-205在膀胱癌患者癌组织及癌旁组织的表达,将miR-205 inhibitors、miR-205 mimics和阴性对照转染至人膀胱癌细胞系T24,qRT-PCR检测miR-205的表达量,划线法检测细胞的迁移能力,Transwell法检验细胞的侵袭能力,Western blot检测E-Cadhein、Vimentin、Slug的表达量,荧光素酶检测miR-205与PLCε 的关系.结果 qRT-PCR结果显示细胞癌组织中miR-205的表达量显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);miR-205 inhibitors组中穿透细胞数明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),miR-205 mimics组中穿透细胞数明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-205 inhibitors组T24迁移率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),miR-205 mimics组T24迁移率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot检测结果显示miR-205 inhibitors组中上皮标志物E-Cadhein的表达明显低于对照组(P<0.05),间质标志物Vimentin、Slug的表达明显高于对照组(P<0.05),miR-205 mimics组上皮标志物E-Cadhein的表达明显高于对照组(P<0.05),间质标志物Vimentin、Slug的表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);双荧光素酶报告基因结果显示,转染miR-205后,野生型PLCε 的荧光素酶活性被抑制(P<0.05),突变型PLCε 的荧光素酶活性无明显变化(P>0.05),说明PLCε和miR-205具有靶向调控关系.Western blot检测上调miR-205细胞系和空白细胞对照中PLCε结果表明,上调miR-205后,PLCε表达水平显著下降(P<0.05),证实miR-205可以特异性结合PLCε并发挥负向调控作用.结论 miR-205在膀胱癌中作为抑癌基因,能够靶向调控PLCε 抑制膀胱癌T24细胞EMT和迁移的作用.
关键词:膀胱癌miR-205EMT侵袭转移
分类号:R737.14(泌尿生殖器肿瘤)
论文发表日期:2020-05-10
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:5( 1291-1295 )
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