阿魏酸对脂多糖诱导的OA软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响
刘新宁
曹滨滨
刘杰
毕建年
赵亮
1.264200 山东省威海市,威海口腔医院骨外科2.264200 山东省威海市,威海口腔医院骨外科3.264200 山东省威海市,威海口腔医院骨外科4.264200 山东省威海市,威海口腔医院骨外科5.264200 山东省威海市,威海口腔医院骨外科
摘要：目的 探讨阿魏酸(Ferulic acid,FA)对脂多糖(LPS)诱导的OA软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法 于4月龄新西兰大白兔膝软骨提取软骨细胞,体外培养后分为4组,空白对照组、OA模型组、OA+FA低剂量组和OA+FA高剂量组,将2μg/ml的LPS加入培养基中培养软骨细胞,构建OA软骨细胞模型,对照组加入等体积的细胞培养液,选取合适的阿魏酸浓度,确定低剂量组和高剂量组,低剂量组和高剂量组则分别加入5μmol/ml、20μmol/ml的阿魏酸进行共培养,甲苯胺蓝染色观察正常软骨细胞形态,qRT-PCR法检测4组软骨细胞Ⅱ型胶原基因的表达(COL2)、软骨细胞基质金属蛋白(MMP-13)基因的表达,CCK-8法检测软骨细胞增殖情况,Western blot检测Wnt2、GSK-3β、β-catenin、COL2、MMP-13、Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 甲苯胺蓝染色法鉴定软骨细胞,软骨细胞在显微镜下呈现形态不规则、梭形透光度良好的多层细胞,细胞核红染,呈球形;qRT-PCR和Western blot结果显示OA模型组COL2基因和蛋白的表达量显著低于空白组(P<0.05).低剂量组、高剂量组COL2的基因和蛋白的表达情况显著高于模型组(P<0.05),且高剂量组的表达水平更高(P<0.05);模型组的MMP-13基因和蛋白的表达显著高于空白组(P<0.05),低剂量组、高剂量组MMP-13基因和蛋白的表达显著低于模型组(P<0.05),且低剂量组的MMP-13蛋白的表达水平更高(P<0.05);CCK-8法检测软骨细胞的增殖细胞情况显示,模型组软骨细胞的增殖情况显著低于空白组(P<0.05),低剂量组、高剂量组软骨细胞的增殖情况显著高于模型组(P<0.05),且高剂量组的增殖水平更高(P<0.05);模型组的Bcl-2/Bax显著低于空白组(P<0.05),低剂量组、高剂量组Bcl-2/Bax显著高于模型组(P<0.05),且高剂量组的Bcl-2/Bax水平更高(P<0.05);与空白组相比,模型组Wnt2、GSK-3β、β-catenin水平明显升高,阿魏酸呈剂量依赖性抑制Wnt2、GSK-3β、β-catenin蛋白表达(P<0.05).结论 阿魏酸可以通过Wntβ-catenin通路影响脂多糖诱导的OA软骨细胞的增殖.
关键词：阿魏酸Wntβ-catenin脂多糖软骨细胞细胞增殖
分类号：R684.3(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
论文发表日期：2020-06-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1610-1614 )
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