Sp1调控DOT1L表达并介导髓核细胞基质代谢的机制研究
陆锐均
陈为坚
王晓飞
1.510700 广州市,广州医科大学附属第五医院2.510700 广州市,广州医科大学附属第五医院3.510700 广州市,广州医科大学附属第五医院
摘要：目的 探讨髓核细胞中Sp1调控DOT1L表达并影响髓核细胞机制代谢的具体机制.方法 分离培养人椎间盘髓核细胞,通过PCR、免疫蛋白印迹法对比腰椎间盘突出症患者与脊柱侧弯患者髓核组织的DOT1L表达差异;通过慢病毒转染敲除髓核细胞中DOT1L表达,利用PCR、免疫蛋白印迹法检测基质代谢相关分子表达和Wnt/β-catenin通路激活水平;检测炎性因子刺激前后髓核细胞相关转录因子表达变化,明确髓核细胞退变相关的关键转录因子;慢病毒敲除、过表达Sp1后检测DOT1L的表达变化情况,明确Sp1与DOT1L的调控关系.结果 腰椎间盘突出症患者髓核组织DOT1L表达显著降低(P<0.05);在髓核细胞中敲除DOT1L表达后,炎性因子刺激下(TNF-α)髓核细胞的基质代谢相关分子MMP3、MMP13明显升高(P<0.05)而CollagenⅡ、Aggrecan显著降低(P<0.05),且Wnt/β-catenin通路激活水平明显升高(P<0.05);炎性因子刺激后转录因子Sp1表达明显升高(P<0.05),而AP-1无明显改变(P>0.05);慢病毒敲除Sp1后DOT1L表达明显降低(P<0.05),而过表达Sp1后DOT1L表达显著升高(P<0.05).结论 炎性因子刺激下,Sp1通过上调DOT1L表达以抑制Wnt/β-catenin通路激活、降低髓核细胞基质代谢水平,发挥椎间盘保护效应.
关键词：髓核细胞DOT1LSp1
分类号：R826.64(军事医学)
资助基金：广东省自然科学基金(2018A0303130349)
论文发表日期：2020-11-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 3365-3369 )
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