RhoA/ROCK-NF-κB信号传导通路介导内脂素诱导的心肌细胞炎性反应机制研究
常亮
徐璐
刘素云
郭炳彦
金鑫
贾妍
李拥军
1.050000 石家庄市,河北医科大学第二医院心内科2.050000 石家庄市,河北医科大学第二医院心内科3.050000 石家庄市,河北医科大学第二医院心内科4.050000 石家庄市,河北医科大学第二医院心内科5.050000 石家庄市,河北医科大学第二医院心内科6.050000 石家庄市,河北医科大学第二医院心内科7.050000 石家庄市,河北医科大学第二医院心内科
摘要：目的 研究内脂素引起心肌细胞炎性反应相关机制.方法 提取2～3 d SD乳鼠原代心肌细胞,培养后按照实验设计分组为(1)正常对照组,10、50、100 ng/ml浓度的重组内脂素,干预24 h;(2)正常对照组,100 ng/ml重组内脂素分别干预12、24、48、72 h;(3)正常对照组、重组内脂素100 ng/ml、SN50(20μmol/L)、SN50(20μmol/L)+重组内脂素100 ng/ml,干预48 h;(4)正常对照组、重组内脂素100 ng/ml、Y27632(10μmol/L)、Y27632(10μmol/L)+重组内脂素100 ng/ml、辛伐他汀(1μmol/L)、辛伐他汀(1μmol/L)+重组内脂素100 ng/ml,干预48 h.(5)正常对照组、重组内脂素100 ng/ml、sirtinol(200μmol/L)、sirtinol(200μmol/L)+重组内脂素100 ng/ml,干预24 h.,并予相应的干预.应用Real time-PCR检测心肌细胞TNF-αmRNA表达,应用MTT法检测心肌细胞活力,Western blot法检测心肌细胞Sirt1蛋白表达.结果 心肌细胞TNF-αmRNA表达随内脂素浓度的升高而升高,100 ng/ml时最高;OD值在浓度为10 ng/ml时最高,50 ng/ml、100 ng/ml时降低,且100 ng/ml时明显低于正常对照组(P<0.05).100 ng/ml内脂素干预心肌细胞48 h时TNF-αmRNA达到峰值,OD值在12 h时与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),24 h后开始降低,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).应用sirtinol预干预心肌细胞后用100 ng/ml内脂素干预心肌细胞24 h,sirtinol+重组内脂素干预组心肌细胞OD值明显低于正常对照组,高于100 ng/ml内脂素干预组(P<0.05).心肌细胞Sirt1蛋白表达水平随着内脂素干预浓度的升高而升高,100 ng/ml内脂素干预48 h后达到峰值,72 h时继续升高,但是较48 h组差异无统计学意义(P>0.05).加用SN50、sirtinol和Y27632预干预组的心肌细胞TNF-αmRNA水平明显低于单纯内脂素干预组,高于正常对照组(P<0.05).结论 内脂素可以直接诱导心肌细胞炎性反应,可能与RhoA/ROCK2-NF-κB信号有关.内脂素诱导的适量SIRT1表达增加对心肌细胞具有正性作用.
关键词：RhoA/ROCK-NF-κB信号传导通路心肌炎症反应内脂素肿瘤坏死因子α
分类号：R542.2(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：国家自然科学基金(81570345)国家自然科学基金(81400217)河北省自然科学基金(H2014206389)河北省科技支撑计划(132777186)
论文发表日期：2020-12-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 3685-3690 )
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