LncRNA ZFPM2-AS1靶向miR-515-5p调控胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭
陈杰
410000 长沙市,湖南省肿瘤医院肝胆肠外科
摘要：目的 探讨长链非编码RNA ZFPM2反义RNA1(ZFPM2-AS1)对miR-515-5p的靶向调控作用以及对胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人肝内胆管上皮细胞HIBEpic和3种胆管癌细胞(RBE、HuCCT1、TFK1)中ZFPM2-AS1和miR-515-5p的表达.将ZFPM2-AS小干扰RNA(si-ZFPM2-AS1)、miR-515-5p模拟物(miR-515-5p mimics)分别转染胆管癌细胞RBE,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验、Transwell实验检测干扰ZFPM2-AS1或过表达miR-515-5p后RBE细胞增殖、迁移侵袭能力变化.蛋白质印记(Western blot)检测细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9蛋白的表达变化.双荧光素酶报告实验和RT-qPCR验证ZFPM2-AS1对miR-515-5p的调控作用.将si-ZFPM2-AS1与miR-515-5p抑制物(anti-miR-515-5p)共转染RBE细胞,采用上述方法检测RBE细胞增殖、迁移侵袭能力变化.Western blot检测干扰ZFPM2-AS1表达对β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达的影响.结果 与HIBEpic细胞比较,3种胆管癌细胞ZFPM2-AS1的表达显著升高,miR-515-5p的表达显著降低(P<0.05).干扰ZFPM2-AS1或过表达miR-515-5p后RBE细胞CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白的表达显著降低,细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05).ZFPM2-AS1靶向miR-515-5p并负调控其表达.干扰ZFPM2-AS1可抑制β-catenin蛋白表达(P<0.05).抑制miR-515-5p表达可减弱干扰ZFPM2-AS1对RBE细胞增殖、迁移、侵袭以及β-catenin蛋白的影响(P<0.05).结论 干扰ZFPM2-AS1通过靶向miR-515-5p可抑制胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关.
关键词：ZFPM2-AS1miR-515-5p胆管癌细胞增殖迁移侵袭
分类号：R575.7(消化系及腹部疾病)
论文发表日期：2021-04-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 976-980 )
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