miR-30a-5p调控HDAC9对心肌细胞氧化应激损伤保护作用的机制研究
余敏1
崔跃1
黎鹏飞1
谢丹1
陈芬2
1.430015 湖北省武汉市红十字会医院心血管内科2.华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科
摘要：目的 探讨miR-30a-5p通过调控组蛋白去乙酰化酶9(HDAC9)对缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡、氧化应激的影响及作用机制.方法 本研究通过体外培养心肌细胞H9 c2,建立缺氧复氧损伤细胞模型,细胞分组为:Control组、H/R组、H/R+miR-NC组、H/R+miR-30a-5p组、H/R+si-NC组、H/R+si-HDAC9组、H/R+miR-30a-5p+pcDNA组、H/R+miR-30a-5p+HDAC9组.qRT-PCR检测miR-30a-5p和HDAC9 mRNA表达;Western blot检测HDAC9、Bax和Bcl-2蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和乳酸脱氢酶(LDH)含量;双荧光素酶报告基因检测miR-30a-5p和HDAC9靶向关系.结果 与Control组比较,H/R组的心肌细胞中miR-30a-5p表达、Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著降低(P<0.05),而细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量、LDH含量HDAC9 mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P<0.05);与H/R+miR-NC组比较,H/R+miR-30a-5p组的心肌细胞中miR-30a-5p表达、Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著增加(P<0.05).与miR-NC组比较,miR-30a-5p组中HDAC93'UTR-wt荧光素酶活性显著降低(P<0.05),而HDAC93'UTR-mut荧光素酶活性没有任何变化.与anti-miR-N组比较,anti-miR-30a-5p组中miR-30a-5p表达显著降低(P<0.05).与miR-NC组比较,miR-30a-5p组中HDAC9蛋白表达显著降低(P<0.05);与anti-miR-N组比较,anti-miR-30a-5p组中HDAC9蛋白表达显著增加(P<0.05).与Control组比较,H/R组的心肌细胞中HDAC9蛋白表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量和LDH含量均显著增加(P<0.05);而Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著降低(P<0.05);与H/R+si-NC组比较,H/R+si-HDAC9组的心肌细胞中HDAC9蛋白表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量和LDH含量均显著降低(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著增加(P<0.05).与H/R+miR-NC组比较,H/R+miR-30a-5p组的心肌细胞中HDAC9蛋白表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量和LDH含量均显著降低(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著增加(P<0.05);与H/R+miR-30a-5p+pcDNA组比较,H/R+miR-30a-5p+HDAC9组的心肌细胞中HDAC9蛋白表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量和LDH含量均显著增加(P<0.05);而Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著降低(P<0.05).结论 miR-30a-5p通过下调HDAC9减缓缺氧复氧诱导的心肌细胞H9c2凋亡和氧化应激损,起到保护心肌细胞的作用.
关键词：miR-30a-5pHDAC9心肌细胞凋亡氧化应激
分类号：R542.2(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：国家自然科学基金(81300196)
论文发表日期：2022-04-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1125-1129,1135 )
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