AGGF1调控AMPK-mTOR-ULK1信号通路促进视网膜血管生成机制研究
李蓉1
姚国敏1
周凌霄1
闫瑾2
张敏3
李亚3
1.710077 西安市,西安医学院第一附属医院眼科2.西安医学院医学技术学院3.710077 西安市,西安医学院第一附属医院内分泌科
摘要：目的 研究G补缀FHA域血管生成因子1(AGGF1)对人视网膜血管内皮细胞(HRMECs)血管生成的影响及机制.方法 将体外培养的HRMECs随机分为对照组、AGGF1组和AMPK信号通路抑制剂Compound C+AGGF1组,对照组细胞在M199培养基中培养,AGGF1组细胞在M199培养基中加入0.5μg/ml AGGF1进行培养,Compound C+AGGF1组在M199培养基中加入5μmol/L Compound C及0.5μg/ml AGGF1进行培养.培养48 h,分别采用Transwell及Matrigel法检测细胞迁移和管腔形成,采用Western blotting法检测各组细胞的自噬关键信号通路蛋白AMPK、mTOR和ULK1的表达,采用可表达GFP-LC3B融合蛋白的质粒转染细胞,荧光显微镜下观察细胞内自噬的变化.结果 AGGF1组中细胞迁移数和管腔形成数均明显高于对照组和Compound C+AGGF1组(均P<0.001),Compound C+AGGF1组细胞迁移数和管腔形成数均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01).对照组、AGGF1组和Compound C+AGGF1组细胞中的AMPK、mTOR和ULK1蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05).AGGF1组细胞中p-AMPK和p-ULK1值均明显高于对照组和Compound C+AGGF1组,差异均有统计学意义(P<0.01),AGGF1组细胞中p-mTOR值均明显低于对照组和Compound C+AGGF1组,差异均有统计学意义(P<0.05);Compound C+AGGF1组的p-AMPK和p-ULK1值均高于对照组(P<0.01),Compound C+AGGF1组的p-mTOR值低于对照组,差异有统计学意义(P<0.001).对照组细胞中出现较弱的GFP-LC3B绿色荧光,AGGF1组绿色荧光明显强于对照组和Compound C+AGGF1组,自噬增强(P<0.001);Compound C+AGGF1组的绿色荧光强于对照组(P<0.05).结论 AGGF1通过激活AMPK-mTOR-ULK1自噬信号通路促进视网膜微血管内皮细胞的血管生成.
关键词：AGGF1自噬AMPK-mTOR-ULK1血管生成视网膜血管内皮细胞
分类号：R774.1(视网膜及视神经疾病)
资助基金：陕西省科技厅社发基金项目(2021SF-157)陕西省科技厅自然科学基金项目(2019JM-514)
论文发表日期：2022-11-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 3365-3369 )
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