达格列净通过miR-140-5p/FNDC5通路调控高糖诱导内皮细胞增殖、凋亡的机制研究
徐伟忠
陈爱华
226100 江苏省南通市海门区人民医院
摘要：目的 探究达格列净(DAPA)调控高糖诱导内皮细胞增殖、凋亡的潜在作用.方法 5.5、30 mmol/L葡萄糖处理的内皮细胞设为正常组(NG)、高糖组(HG);达格列净DAPA(20、40、80 μmol/L)处理HG细胞.脂质体法将agomiRNA组(转染agomiRNA)、agomiR-140-5p组(转染agomiR-140-5p)、antagomiRNA组(转染antagomiRNA)、antagomiR-140-5p组(转染antagomiR-140-5p)、si-NC组(转染si-NC)、si-FNDC5 组(转染si-FNDC5)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-FNDC5 组(转染pcDNA-FNDC5)、80 μmol/L+agomiRNA组(转染agomiRNA再用 80 μmol/L处理)、80 μmol/L+agomiR-140-5p组(转染agomiR-140-5p再用 80 μmol/L的DAPA处理)、80 μmol/L+agomiR-140-5p+pcDNA组(共转染agomiR-140-5p和pcDNA并用80 μmol/L的DAPA处理)、80 μmol/L+agomiR-140-5p+pcDNA-FNDC5 组(共转染agomiR-140-5p和pcDNA-FNDC5 并用 80 μmol/L的DAPA处理)转染至内皮细胞.实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验、蛋白免疫印迹(WB)实验检测细胞miR-140-5p、FNDC5、Ki67、PCNA、caspase-3 的表达;细胞计数试剂盒(CCK8)、流式细胞术检测细胞增殖、凋亡;双荧光素酶报告实验检测细胞荧光活性.结果 与NG组比较,HG组细胞增殖率显著降低,凋亡率显著升高,Ki67、PCNA蛋白表达显著降低,caspase-3 的蛋白表达显著升高,miR-140-5p表达显著升高,FNDC5 表达均显著降低(P<0.05).过表达miR-140-5p或敲减FNDC5 具有相似的抑制HG细胞增殖,促进凋亡的作用,而抑制miR-140-5p或过表达FNDC5 则具有相反的作用.双荧光素酶报告实验显示,miR-140-5p靶向负调控FNDC5.过表达FNDC5 可部分逆转过表达miR-140-5p对HG细胞的增殖、凋亡调控,增强DAPA的作用.结论 DAPA可减轻高糖对内皮细胞的增殖抑制和凋亡促进作用,其潜在的作用机制与抑制miR-140-5p/FNDC5 通路有关.
关键词：达格列净糖尿病血管病变miR-140-5pFNDC5增殖凋亡
分类号：R915(药物基础科学)R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金：江苏省优势学科建设工程项目(YSHL0803-745)
论文发表日期：2023-04-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 991-996 )
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