鞘内注射siRNA-P300抑制CaMK Ⅱ磷酸化缓解佐剂性关节炎大鼠疼痛与炎症的作用机制
谈俊1
高巍巍1
滕志鹏2
王广2
代震宇3
李炜1
1.400021 重庆市中医院疼痛科2.400021 重庆市中医院神经外科3.400021 重庆市中医院骨伤科
摘要：目的 研究敲低转录辅因子P300 对佐剂性关节炎大鼠的痛觉和炎症的影响并探讨钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMK Ⅱ)介导的机制.方法 60 只SPF级别健康成年SD大鼠,随机分为A、B、C、D、E、F共 6 组(n=10).A组:对照组;B组:关节模型组;C组:siRNA-P300 的阴性对照(siRNA-NC)+关节炎模型组;D组:siRNA-P300+关节炎模型组;E组:siRNA-P300+二甲基亚砜(DMSO)+关节炎模型组;F组:siRNA-P300+油酸+关节炎模型组.各组大鼠造模前 1d及造模后 1 d、7 d、14 d的 5 个时间点分别使用Von Frey纤维丝刺激针以及热辐射痛检测仪分别检测大鼠左后足的机械痛阈值(MWT)和热缩足潜伏期(PWTL),使用电子千分卡尺测左后足跖厚度;于造模后 14d处死动物取脊髓L4～L5 节段,采用免疫组织化学法检测脊髓 P 物质(SP)、c-fos、p-CaMK Ⅱ的表达水平;蛋白免疫印迹检测CaMK Ⅱ的磷酸化(p-CaMK Ⅱ)水平.ELISA法检测血清TNF-α、L-1β、IL-6 的水平.结果 与A组比较,B组造模后1 d、7 d、14 d 的MWT和PWTL均下调,差异均有统计学意义(P<0.05),B组左后足跖厚度增加且TNF-α、L-1β、IL-6上调,差异均有统计学意义(P<0.05),脊髓的 SP、c-fos、p-CaMK Ⅱ的表达水平均上调,差异均有统计学意义(P<0.05).与C组比较,D组在造模后 1 d、7 d、14 d的MWT和PWTL均上调,差异均有统计学意义(P<0.05),D组的足跖厚度减少且TNF-α、IL-1β、IL-6下调,差异均有统计学意义(P<0.05),脊髓的SP、c-fos、p-CaMK Ⅱ阳性率和表达水平均下调,差异均有统计学意义(P<0.05).与E组比较,F组在造模后 1 d、7 d、14 d 的MWT和PWTL均下调,差异均有统计学意义(P<0.05),F组TNF-α、L-1β、IL-6有小幅度上调,差异均有统计学意义(P<0.05),脊髓的SP、c-fos、p-CaMK Ⅱ的表达水平均上调,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 鞘内注射siRNA-P300 可通过抑制CaMK Ⅱ磷酸化缓解佐剂性关节炎大鼠疼痛与炎症作用.
关键词：P300CaMK Ⅱ佐剂性关节炎疼痛炎症
分类号：R684.3(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
资助基金：国家自然科学基金(81702202)重庆市自然科学基金面上项目(cstc2020jcyj-msxmX0116)
论文发表日期：2023-08-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 2271-2276 )
英文信息