circPRKCI靶向miR-448对高脂高糖诱导胰岛β细胞损伤的影响
王梅1
谭金枚2
1.430040 湖北省武汉市东西湖区人民医院内分泌科2.长江航运总医院内分泌科
摘要:目的 考察环状RNA(circRNA)circPRKCI是否靶向miR-448 调节高脂高糖诱导的胰岛β细胞损伤.方法 胰岛β细胞被分为Con组(正常对照,11.1 mmol/L葡萄糖)、Model组(高脂高糖模型,33.3 mmol/L 葡萄糖+ 0.25 mmol/L棕榈酸)、Model+pcDNA组(高脂高糖模型+转染pcDNA)、Model+pcDNA-circPRKCI组(高脂高糖模型+转染pcDNA-circPRKCI)、Model+anti-miR-NC组(高脂高糖模型+转染anti-miR-NC)、Model+anti-miR-488 组(高脂高糖模型+转染anti-miR-488)、Model+pcDNA-circPRKCI+miR-NC组(高脂高糖模型+转染 pcDNA-circPRKCI+miR-NC)、Model+pcDNA-circPRKCI+miR-448 组(高脂高糖模型+转染 pcDNA-circPRKCI+miR-448).采用 qRT-PCR 检测circPRKCI、miR-448、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA表达,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测活化-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved-cysteinyl aspartate specific proteinase,cleaved-caspase)3 和cleaved-caspase9 蛋白表达.运用荧光素酶报告分析circPRKCI与miR-448 的靶向结合.结果 与Con组比较,Model组胰岛β细胞中circPRKCI表达量减少,miR-488 表达量、凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9 蛋白表达量、TNF-α mRNA和IL-1β mRNA表达量增加(P<0.05).与Model+pcDNA组比较,Model+pcDNA-circPRKCI组胰岛β细胞中circPRKCI表达量增加,凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9 蛋白表达量、TNF-α mRNA和IL-1β mRNA表达量减少(P<0.05).circPRKCI靶向调控miR-448 的表达.抑制miR-448 表达后,Model+anti-miR-488 组胰岛β细胞的miR-488 表达量、凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9 蛋白、TNF-α mRNA和IL-1β mRNA表达量均比Model+anti-miR-NC组降低(P<0.05).上调miR-448 表达后,Model+pcDNA-circPRKCI+miR-448 组胰岛β细胞的miR-488 表达量、凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9 蛋白、TNF-α mRNA 和 IL-1β mRNA 表达量均比 Model+ pcDNA-circPRKCI+miR-NC组提升(P<0.05).结论 circPRKCI通过靶向miR-448,减少细胞凋亡和炎性因子表达,从而保护高脂高糖诱导的胰岛β细胞损伤.
关键词:糖尿病circPRKCI胰岛β细胞miR-448高脂高糖凋亡炎症
分类号:R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)
资助基金:武汉市医学科研项目(WX20D48)
论文发表日期:2023-10-25
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 3045-3049,3055 )
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河北医药

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ISSN:1002-7386
年,卷(期):2023,45(20)
所属栏目:论著