沉默SOCS1联合rAAV/PSA基因修饰的树突状细胞疫苗治疗前列腺癌的实验研究
宋浩杰1
宋琴1
施为建1
吕成伟2
蒋凤莲1
王丽1
李全泳1
1.528403 广东省中山市博爱医院肿瘤科2.南方医科大学南方医院临床医学实验研究中心
摘要：目的 研究沉默细胞因子信号抑制因子 1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)基因联合rAAV/PSA基因修饰的树突状细胞(dendritic cell,DC)对前列腺癌LNCaP细胞的体外杀伤效应.方法 应用重组腺相关病毒(rAAV)介导的RNA干扰技术沉默人DC的SOCS1 基因的表达,行Western blot检测基因沉默效果.rAAV-shRNA-SOCS1 和rAAV/PSA感染DC,将DC细胞分为Control-DC组、rAAV/PSA-DC组、SOCS1(-)+rAAV/PSA-DC组.采用系列细胞因子诱导DC成熟,诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL).流式细胞术检测分析各组DC细胞表型及CTL细胞的免疫表型;ELISA法检测各组DC细胞培养上清中细胞因子白介素-10(IL-10)及IL-12 p70 的分泌水平,各组CTL细胞释放γ-干扰素(IFN-γ)的水平;LDH 法检测各组 CTL 细胞对前列腺癌 LNCaP 靶细胞的杀伤效率.结果 rAAV-shRNA-SOCS1 感染DC后,可有效下调DC的SOCS1 表达水平.与对照组比较,沉默SOCS1 联合rAAV/PSA基因修饰的DC细胞培养上清中细胞因子IL-12 p70 的分泌水平显著增高,IL-10 的分泌水平明显下降(P＜0.05);该组DC表面分子CD80、CD83 和CD86 的表达明显上调(P＜0.05).该组DC诱导的CTL中CD8+、CD8+CD69+T细胞的比例明显增高,而CD4+ T细胞、CD4+CD25+ FoxP3+ Treg 细胞的比例显著降低(P＜0.05),IFN-γ 的释放水平明显增高(P＜0.05),对PSA阳性的前列腺癌靶细胞 LNCaP 具有更强的杀伤活性(P＜0.05),且具有抗原特异性.结论 沉默SOCS1 联合rAAV/PSA基因修饰的DC疫苗可以产生高效而特异性的抗前列腺癌免疫效应.
关键词：细胞因子信号抑制因子1基因沉默腺相关病毒前列腺癌特异性抗原前列腺癌疫苗
分类号：R737.25(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(81071847)广东省科技计划项目(2008B030301156)广东省中山市医学科研项目(2021A020054)
论文发表日期：2023-10-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 3056-3060 )
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