基于NF-κB信号通路探讨长链非编码RNA NORAD对IL-1β诱导骨关节炎软骨细胞炎症损伤的作用
陈永锋
宋和强
王鹏
郭建伟
陈晓超
710032 西安市,中国人民解放军空军军医大学第一附属医院骨科
摘要：目的 探讨长链非编码 RNA NORAD(long non-coding RNA NORAD,lncRNA NORAD)对白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的骨关节炎软骨细胞炎症损伤的作用和机制.方法 采用IL-1β刺激软骨细胞建立骨关节炎的细胞模型.软骨细胞分为对照组、IL-1β组(10 ng/mU的IL-1β刺激软骨细胞 24 h)、IL-1β+si-NC组(转染NC siRNA 48 h后,进行IL-1β刺激)和IL-1β + si-NORAD组(转染NORAD siRNA 48 h后,进行IL-1β刺激).实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测NORAD的表达水平.Calcein AM细胞活性检测试剂盒检测软骨细胞的存活率.一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测软骨细胞凋亡.Western blot检测Bax、Bcl-2、MMP-13、COL2A1 和NF-κB p65 的蛋白表达水平.ELISA试剂盒检测细胞炎性因子IL-6和TNF-α的浓度.结果 与对照组比较,IL-1β组的NORAD表达水平显著升高(P<0.01).与IL-1β + si-NC组比较,IL-1β + si-NORAD组的NORAD表达水平显著降低(P<0.01).与对照组比较,IL-1β组和IL-1β + si-NC组软骨细胞的存活率显著降低(P<0.01),细胞凋亡水平显著升高(P<0.01),细胞外基质降解显著增加(P<0.01),IL-6和TNF-α浓度显著升高(P<0.01),NF-κB p65 蛋白的磷酸化水平显著升高(P<0.01).与IL-1β组和IL-1β + si-NC组比较,IL-1β + si-NORAD组软骨细胞的存活率显著提高(P<0.01),细胞凋亡水平显著下降(P<0.01),细胞外基质降解显著降低(P<0.01),IL-6和TNF-α浓度显著下降(P<0.01),NF-κB p65 蛋白的磷酸化水平显著降低(P<0.01).结论 基因沉默lncRNA NORAD可以缓解IL-1β诱导的软骨细胞炎症损伤,其保护作用可能是通过下调NF-κB信号通路实现的.
关键词：骨关节炎软骨细胞炎性反应长链非编码RNANORAD
分类号：R684.3(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
资助基金：陕西省重点研发计划(2023-ZDLSF-14)
论文发表日期：2024-01-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 186-191 )
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