肾小管HIF-1α/miR-23a通路在脓毒血症急性肾损伤中的作用机制
陈思宇1
强立娟2
朱嘉兴2
马世兰2
陈占龙2
1.610200 四川省成都市双流区第一人民医院医学检验科2.宁夏回族自治区人民医院急诊科
摘要：目的 探讨肾小管低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/MicroRNA-23a(miR-23a)通路在脓毒血症急性肾损伤(SA-AKI)中的作用及相关作用机制.方法 体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2 细胞),采用脂多糖(LPS)处理HK-2细胞构建SA-AKI细胞模型.LPS处理的HK-2 细胞分为LPS组、NC siRNA 组、HIF-1α siRNA组、anti-miR-NC组、anti-miR-23a组、HIF-1α siRNA+miR-NC组、HIF-1α siRNA+miR-23a组,以正常培养的HK-2 细胞作为空白对照组(Control组).采用qRT-PCR法检测细胞中HIF-1α、miR-23a基因表达;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测细胞中炎性因子[白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平;Western blot法检测细胞中HIF-1α蛋白、NF-κB通路蛋白表达.结果 与Control组比较,LPS组HK-2 细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均升高,细胞活力降低,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高(P<0.05).与LPS组比较,HIF-1α siRNA组HK-2细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均降低,细胞活力升高,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低(P<0.05).与LPS组比较,anti-miR-23a组HK-2细胞中miR-23a mRNA表达水平降低,细胞活力升高,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低(P<0.05).与HIF-1α siRNA组比较,HIF-1α siRNA+miR-23a组HK-2 细胞中miR-23a mRNA表达水平升高,细胞活力降低,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高(P<0.05).与Control组比较,LPS组HK-2 细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均升高(P<0.05).与LPS组比较,HIF-1α siRNA组和anti-miR-23a组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均降低(P<0.05).与HIF-1α siRNA组比较,HIF-1α siRNA+miR-23a组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均升高(P<0.05).结论 肾小管HIF-1α通过调控miR-23a表达调节NF-κB信号通路,从而参与LPS诱导的肾小管上皮细胞损伤.
关键词：脓毒血症急性肾损伤肾小管上皮细胞肾小管低氧诱导因子-1αmiR-23a炎性反应细胞凋亡NF-κB信号通路
分类号：R692(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
资助基金：宁夏自然科学基金项目(2021AAC03309)
论文发表日期：2024-03-10
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 645-651 )
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