miR-325-3p通过靶向HE4抑制卵巢癌细胞SKOV3化疗耐药性的研究
王恒
563000 贵州省遵义市,贵州航天医院
摘要：目的 探讨miR-325-3p通过靶向人附睾蛋白4(HE4)基因对卵巢癌细胞SKOV3顺铂(CDDP)耐药的影响.方法 采用浓度梯度递增法构建对CDDP耐药的卵巢癌细胞株SKOV3/DDP.CCK-8检测经不同浓度梯度的CDDP处理后亲代细胞SKOV3和耐药细胞SKOV3/DDP对CDDP的耐药性.随后,将SKOV3/DDP细胞随机分为空白对照组,阴性对照组和miR-325-3p组.其中,空白对照组不做任何处理,阴性对照组细胞转染阴性对照miR-NC,miR-325-3p组转染miR-325-3pmimic.采用CCK-8检测细胞半数抑制浓度(IC50).流式细胞术检测细胞凋亡率.TargetScan数据库预测miR-325-3p与HE4 mRNA 3'UTR的结合位点.双荧光素酶报告基因实验验证miR-325-3p与HE4 mRNA 3'UTR的靶向性.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-325-3p和HE4 mRNA表达.Westernblotting实验检测HE4蛋白表达.结果 亲代细胞SKOV3对CDDP的IC50为14.15 μM,耐药细胞SKOV3/DDP对CDDP的IC50为45.29 μM,且耐药倍数(RI)为3.20.与亲代细胞SKOV3比较,耐药细胞株SKOV3/DDP中miR-325-3p表达明显降低(P＜0.05),而HE4 mRNA和蛋白表达明显升高(P＜0.05).另外,与空白对照组比较,阴性对照组中miR-325-3p表达、HE4 mRNA和蛋白表达、对CDDP的IC50以及细胞凋亡率均无明显差异(P＞0.05).与阴性对照组比较,miR-325-3p组中miR-325-3p表达、细胞凋亡率均显著升高(P＜0.05),而对CDDP的IC50、HE4 mRNA和蛋白表达明显降低(P＜0.05).结论 miR-325-3p通过靶向HE4抑制卵巢癌细胞SKOV3对CDDP的耐药性.
关键词：miR-325-3pHE4卵巢癌细胞CDDP耐药性
分类号：R737.31(泌尿生殖器肿瘤)
论文发表日期：2024-10-25
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 3051-3055 )
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