产毒微囊藻mcyA基因荧光定量PCR方法的建立
何恩奇1
钮伟民1
吴庆刚1
周伟杰1
晏丽2
张银志3
孙秀兰2
1.无锡市疾病预防控制中心,江苏无锡,2140232.江南大学食品学院,江苏无锡,2141223.江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡,214122
摘要：针对微囊藻毒素合成酶基因mcyA探索一种适用于自然水样中微囊藻毒素产毒潜能检测的TaqMan实时荧光定量PCR方法.该方法从铜绿微囊藻FACHB-1279中的mcyA基因中扩增出目的基因片段,用TA克隆方法将基因片段插入Allel TA vector (ABP-CETAVEC020)中来制备质粒标准晶.通过不同连续稀释倍数的质粒标准品成功构建了mcyA基因的标准曲线,该法构建的标准曲线相关系数高达0.9983,满足实时荧光定量RT-PCR的要求.该方法检测所需水样少(仅200 μL),具有水样基因组提取操作简便、快速、线性范围广、灵敏度高等优点,能应用于水库、湖泊等水源中具有产毒性能的微囊藻的快速定量检测.
关键词：铜绿微囊藻mcyATaqMan实时荧光定量PCR水样
分类号：X172(环境生物学)
资助基金：江苏省卫生厅科研项目(HD200865)无锡市科技局指导性项目(CSZ00958)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 66-70 )
英文信息