厌氧氨氧化活性污泥DNA高效提取方法探究
倪敏1
李祥2
刘婷婷1
毕贞2
潘杨2
1.苏州科技大学江苏省环境科学与工程重点实验室,江苏苏州 215009;苏州科技大学环境科学与工程学院,江苏苏州 2150092.苏州科技大学环境科学与工程学院,江苏苏州 215009
摘要：为了揭示自动和手动抽提方法所得DNA的差异,分析该差异所造成的本质原因,探求提高厌氧氨氧化(Anammox)活性污泥DNA抽提效率的方法;通过不同人员自动和手动抽提Anammox活性污泥,比较DNA得率与质量,发现手动抽提DNA浓度显著高于自动抽提(P＜0.05)、DNA质量与自动提取结果无显著差异(A260/280值在1.8～2.0之间);比较不同人员抽提效率,结果表明自动抽提DNA浓度和质量稳定性高于手动抽提.通过调整自动抽提裂解液、洗脱液、污泥用量优化自动提取过程,发现350 mg活性污泥(13000r/rin离心3min)、900μL裂解液、100 μL洗脱液提取的DNA效率最高,是自动提取的最优使用量,对DNA抽提效率的影响由大到小依次为洗脱液、污泥用量、裂解液.综上,手动抽提用于杂质含量少、微生物丰度低的样品,误差较小,自动抽提用于杂质繁杂、微生物富集较好的样品,抽提稳定性较高.
关键词：厌氧氨氧化活性污泥自动抽提手动抽提提取效率
分类号：X172(环境生物学)
资助基金：国家自然科学基金(51778390)江苏省自然科学基金(BK20171219)苏州科技大学校基金(XKZ2017001)
论文发表日期：2019-10-28
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 83-87 )
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