悬浮细胞电穿孔转染参数的选择研究
樊占威1
王晗2
王柏春1
刘宏宇1
1.哈尔滨医科大学附属第一医院心血管外科,黑龙江,哈尔滨,1500012.黑龙江省疾病控制中心,黑龙江,哈尔滨,150030
摘要：目的 以凋亡抑制蛋白家族成员Survivin为目的 基因,对采用电穿孔转染悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞的各种参数进行选择,以提高转染效率.方法 通过选择不同的电压、温度、细胞状态等转染参数,采用不同参数组合将化学合成靶向Survivin的siRNA导入悬浮培养的小鼠原代淋巴细胞,用倒置显微镜观察细胞计数,台盼兰拒染试验来评估siRNA的转染率和细胞存活率.结果 小鼠原代淋巴细胞在350 V,40 μs条件下,可获得最大转染率,约为31% ;良好的细胞状态以及低温条件等参数均可获得更好的转染效果.结论 电穿孔转染法是一种高效的基因转染方法,通过选择经优化的针对悬浮细胞的转染参数,可以获得较高的转染率.
关键词：电穿孔转染悬浮细胞转染参数优化
分类号：R-332(实验医学、医学实验)
论文发表日期：2010-12-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 893-895,902 )
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