Livinα基因特异性shRNA在乳腺癌细胞MCF7中的表达鉴定
饶冬梅1
张春斌2
1.山东协和学院医学院,山东济南,2501092.佳木斯大学基础医学院,黑龙江佳木斯,154007
摘要：目的：研究凋亡抑制因子α（ Livinα）特异的短发夹状 RNA（ shRNA）在MCF7乳腺癌细胞中对外源 Livinα基因表达的抑制作用。方法构建4组EGFP－Livinα融合表达的重组质粒，其中两组分别含shRNA 1、shRNA2对应的不同序列的cDNA干扰片断，分别电转染入MCF7乳腺癌细胞中，48h 后用荧光显微镜观察各实验组细胞中EGFP的表达，流式细胞仪检测转染后各组细胞的平均荧光强度。应用逆转录－聚合酶链反应（ RT－PCR）检测各组细胞中Livin α在RNA水平和蛋白水平的表达。结果酶切及测序证实质粒构建成功；荧光显微镜观察结果显示载体成功转染入MCF7乳腺癌细胞；干扰片段shRNA2可有效抑制目的基因mRNA的表达。结论成功构建的含目的基因有效干扰片断的质粒可抑制目的基因在MCF7乳腺癌细胞中的表达。
关键词：凋亡抑制因子αRNA干扰乳腺癌
分类号：R737.9(泌尿生殖器肿瘤)
论文发表日期：2015-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 593-597 )