不同浓度的糖对原代心肌细胞存活率的影响
白雪1
杨晓敏2
1.内蒙古科技大学包头医学院研究生院,内蒙古包头0140402.包头医学院第二附属医院,内蒙古包头014030
摘要：目的 探讨新生wister大鼠原代心肌细胞在不同浓度糖的培养基中细胞增殖的情况.方法 无菌条件下,取新生1～3天的wistar乳鼠心脏的心尖部三分之二的组织,采用Ⅱ型胶原酶单酶消化的方法,短时多次消化,收集消化好的细胞,采用差速贴壁的方法和化学抑制剂法去除成纤维等非心肌细胞.细胞在含10％FBS的低糖培养基中生长48～72 h后,横纹肌动蛋白鉴定心肌细胞;之后细胞换为含1％FBS的低糖培养基饥饿24 h,共分为六组,对照组合糖5.5 mmol/L,实验组合糖为20 mmol/L,33 mmol/L,40 mmol/L,50 mmol/L,60 mmol/L,分别培养24 h、48 h、72 h后,通过显微镜下观察记录心肌细胞的搏动次数,MTT检测细胞增值率.结果 细胞培养18h后已基本贴壁生长,呈现为圆形、梭型、三角形等,24 h开始出现自发性搏动,48 h后显微镜下细胞立体感十分明显,有伪足生出,形态为典型的梭型,细胞收缩有力;免疫组化鉴定细胞纯度在95％以上;细胞在不同浓度的糖作用培养20 h、48 h、72 h后心肌细胞搏动次数各不同(P＜0.05);细胞在不同浓度的高糖作用48 h后,存活率呈明显下降趋势(P＜0.05).结论 采用单一胶原酶消化法能够培养出纯度高、活力强的原代心肌细胞,且方法简便省时,可重复性高;不同高糖浓度的培养基对细胞的增殖具有抑制作用.
关键词：高糖原代培养心肌细胞细胞存活率
分类号：R54(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：国家自然科学基金(81460068)包头医学院科学研究基金项目(BYJJ-DF201705)内蒙古自然基金项目(2018MS08140)
论文发表日期：2020-03-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 330-333 )
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