骨形态发生蛋白在类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中表达
刘强1
顾金金2
张龙锋1
1.江苏大学附属医院医学检验科,江苏 镇江 2120012.镇江市第一人民医院老年医学科,江苏 镇江 212002
摘要：目的 构建人外周血单个核细胞中骨形态发生蛋白(BMPs)(BMP2,BMP4,BMP6,BMP7,BMP9)mRNA的定量PCR检测方法;利用荧光定量PCR检测研究BMPs mRNA在类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中的表达情况.方法 利用primer3在线软件设计BMP2,BMP4,BMP6,BMP7,BMP9的定量PCR检测引物并比对其扩增产物信息;收集类风湿性关节炎患者60例(RA组)和健康对照组30例(NC组)的外周血,利用人单个核细胞分离液分离单个核细胞并提取总RNA,然后逆转录成cDNA;最后利用定量PCR检测各标本中BMPs表达水平,采用2-△△Ct法计算各指标相对表达水平.结果(1)成功设计出BMP2,BMP4,BMP6,BMP7,BMP9的定量PCR引物,其扩增产物长度为168 bp～203 bp,扩增曲线提示目的基因与内参基因β-actin扩增效率一致(扩增曲线斜率差<0.1).(2)RA组与NC组相比BMP2表达相对上调1.21(0.8)倍(t=0.22,P=0.005)、BMP6表达相对下调0.95(0.26)倍(t=0.176,P=0.043),差异有统计学意义.RA组与NC组相比BMP4表达下调0.41(0.33)倍(t=0.098,P=0.583)、BMP7表达相对下调0.49(0.58)倍(t=0.125,P=0.285)、BMP9表达相对下调0.39±0.21倍(t=0.084,P=0.76),差异均无统计学意义.(3)RA组按照DAS28评分分为RA1组(n=12,DAS28评分<2.6,病情缓解),RA2组(n=14,DAS28评分≥2.6且<3.2,低度活动),RA3组(n=16,DAS28评分≥3.2且<5.1,中度活动),RA4组(n=18,DAS28评分≥5.1,高度活动).BMP2表达水平随着DAS28评分增高表达逐渐升高,BMP4,BMP6,BMP7,BMP9表达水平随着DAS28评分增高逐渐降低,RA各组BMPs表达差异有统计学意义(P=0.000).(4)BMP2与DAS28评分呈显著正相关(r=0.886,P=0.000);BMP6与DAS28评分呈显著负相关(r=-0.825,P=0.000),差异均有统计学意义.结论 RA组外周血单个核细胞中BMP2 mRNA表达明显上调,BMP6 mRNA表达明显下调, BMP4 mRNA、BMP7 mRNA、BMP9 mRNA表达差异无统计学意义,BMP2与DAS28评分呈显著正相关,但BMP6与DAS28评分呈显著负相关,提示BMPs作为RA患者的分子标志物具有潜在的应用价值.
关键词：骨形态发生蛋白荧光定量PCR类风湿性关节炎
分类号：R392.9(医学免疫学)
资助基金：江苏大学临床医学专项(JDLCZX020)
论文发表日期：2020-09-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 1203-1207 )
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