羊水细胞培养前后提取DNA行地中海贫血基因分型检测的推荐流程
陈晓芳1
叶婉婷2
林雨虹3
周晓燕3
林琴3
1.福建省平潭综合实验区海坛街道社区卫生服务中心,福建 平潭 3504002.福建省平潭综合实验区中医院,福建平潭 3504003.福建医科大学附属福州市第一医院检验科,福建 福州 350009
摘要：目的:将羊水细胞DNA提取的操作流程标准化,为即将开展羊水地中海贫血基因分型检测的医院或机构提供可参考的建议和数据.方法:收集羊水标本,利用北京天根公司的微量样本基因组DNA提取试剂盒(天根),通过控制标本的存放温度、存放时长、实验吸样体积以及模拟母血污染,来判断对羊水地贫基因分型检测(反向PCR杂交法)结果的影响.结果:2 mL羊水使用天根提取DNA浓度为(26.36±2.85)%,吸光度(OD260/280)为(1.79±0.01).置于室温、4℃和-20℃存放24h浓度均达到地贫检测标准.4℃存放0、24、48、72 h浓度分别为26.32%、26.35%、25.98%、25.45%.细胞培养后,取25 mL培养瓶满板20%的量提取DNA浓度为205.10%,OD280/260为2.06.0.08%及以下含量全血污染下的羊水细胞(DNA模板约50 ng)地贫基因型并不受影响,而0.1%及以上含量全血的羊水细胞地贫基因型受到影响.结论:使用天根试剂盒并控制羊水细胞存放时间、吸收量、减少母血污染率及使用培养后的羊水细胞,有利于提高提取DNA的效率,从而保证羊水细胞地贫基因分型检测的准确性.
关键词：地中海贫血羊水DNA提取产前诊断
分类号：R556(血液及淋巴系疾病)
论文发表日期：2025-01-14
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 70-73 )
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