副溶血性弧菌溶血相关毒素基因原核融合表达载体的构建
苏建新1
聂军2
苏桂栋3
李兴国1
李志峰2
1.广州军区军事医学研究所流行病研究室,广州,5105072.第一军医大学流行病教研室3.第一军医大学附属南方医院
摘要:目的:实现副溶血性弧菌溶血相关毒素 TRH 基因在大肠杆菌中的融合表达,以获得纯度较高的蛋白产物.方法:构建trh基因的原核融合表达系统PRII(trh/pGEX-3X/DE3),并在31℃条件下,用0.6mmol/L IPTG 诱导表达.用SDS-PAGE 分析蛋白表达.结果:PRII在上述条件下诱导后,目的蛋白呈高效、可溶、融合性表达.薄层扫描显示,细菌的周质腔中的蛋白量最高,SDS-PAGE 表明,融合蛋白的相对分子量(Mr)为49Kda,与预期结果一致.结论:trh基因在原核融合表达系统pGEX-3X/DE3 中获得成功表达,为基因工程大规模制备高纯度TRH抗原、构建基因工程菌苗、阐明该菌的致病机制奠定了基础.
关键词:副溶血弧菌溶血相关毒素大肠杆菌克隆表达
分类号:R378.3(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
资助基金:广东省医药卫生科研项目(A2000347)
论文发表日期:2003-09-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 1-3 )
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