稳定高效表达BRP 44的PC-3细胞系的建立
白巍
李黔生
吴刚
彭亮
靳风烁
1.第三军医大学大坪医院野战外科研究所,重庆,4000422.第三军医大学大坪医院野战外科研究所,重庆,4000423.第三军医大学大坪医院野战外科研究所,重庆,4000424.第三军医大学大坪医院野战外科研究所,重庆,4000425.第三军医大学大坪医院野战外科研究所,重庆,400042
摘要：目的 建立稳定高效表达BRP 44的PC-3细胞系.方法 下载BRP 44的全长mRNA序列,用Oligo 6进行引物设计,在上下游引物的5'引入相应的Hind Ⅲ、EcoR Ⅰ限制性内切酶识别序列及保护碱基.提取LNCaP细胞的总RNA反转录成cDNA进行PCR扩增,产物连接到真核表达载体pcDNA 3.1/myc-His A中构建成重组体.重组载体经酶切和测序鉴定后,阳离子脂质体转染法转染PC-3细胞、G 418筛选、Northern杂交检测并挑选出表达最强的亚克隆.结果 成功构建BRP 44的真核表达载体并获得高效稳定表达的BRP 44基因的PC-3细胞亚克隆.结论 高效稳定表达BRP44的PC-3细胞亚克隆可用于下一步研究.
关键词：BRP44PC-3细胞系稳定转染前列腺癌
分类号：R329(人体形态学)
资助基金：国家自然科学基金(30400446)
论文发表日期：2007-05-02
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 6-9 )
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