肺癌A549细胞条件培养基经Akt1途径抑制血管内皮细胞凋亡
熊畅1
戢艳琼2
罗强1
刘先军1
雷怀定1
卢进昌1
1.郧阳医学院附属太和医院呼吸内科,湖北十堰,4420002.郧阳医学院附属太和医院干部科,湖北十堰,442000
摘要：目的 研究肺癌A549细胞条件培养基对血管内皮细胞凋亡的影响及机制.方法 以5%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)为对照,用人肺癌A549细胞株条件培养基孵育脐静脉内皮细胞(human umbilical veins endothelial cells,HUVECs),Annexin V-FITC试剂盒染色,流式细胞仪进行细胞凋亡定量.设计针对蛋白激酶B(protein kinase B,Akt1)基因mRNA的siRNA (siAkt1)和非特异性对照序列(siSCR)转染HUVECs,用RT-PCR技术检测Akt亚型mRNA的表达,用Western blotting 技术检测Akt总蛋白表达,并观察细胞凋亡的变化.结果 A549条件培养基明显抑制了HUVECs的凋亡(凋亡率3.03%,显著低于对照组的12.69%,P<0.05).筛选出的siAkt1能显著抑制HUVECs的Akt1 mRNA和Akt总蛋白表达(分别下调81%和62%),转染siAkt1后的HUVECs再用A549条件培养基孵育凋亡明显增强(与siSCR组相比P<0.01).结论 肺癌A549细胞条件培养基经Akt1途径抑制血管内皮细胞凋亡,这将为肺癌血管生成的机制研究和干预治疗提供新的分子靶点.
关键词：肺癌内皮细胞凋亡蛋白激酶B
分类号：R734.2(呼吸系肿瘤)
资助基金：湖北省十堰市科技局重点项目(2005ZD017)湖北省十堰市科技局重点项目(2006ZD09)
论文发表日期：2010-07-02
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 272-274,277 )
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