复制型HBV-Tg小鼠原代肝细胞的培养
陶鑫
易学瑞
袁有成
刘振扬
张欣蕊
孔祥平
1.解放军458医院全军肝病中心,广东广州,5106022.解放军458医院全军肝病中心,广东广州,5106023.解放军458医院全军肝病中心,广东广州,5106024.解放军458医院全军肝病中心,广东广州,5106025.解放军458医院全军肝病中心,广东广州,5106026.解放军458医院全军肝病中心,广东广州,510602
摘要：目的 建立复制型HBV-Tg原代肝细胞体外培养方法,观察HBV-Tg小鼠原代肝细胞的氧化应激敏感性.方法 改良的两步灌注法分离、纯化、培养HBV-Tg小鼠原代肝细胞,24孔板培养7天,每天换液,收集上清,检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、丙氨酸转移酶(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸转移酶(aspartate transaminase,AST)、白蛋白(albumin,ALB)和病毒学指标HBsAg、HBV-DNA的水平;分离HBV-Tg小鼠与野生型Balb/c鼠肝细胞,培养24h后加不同浓度酒精,于16h后检测两种小鼠原代肝细胞培养上清的AST水平.结果 HBV-Tg小鼠原代肝细胞从铺板第3天开始,LDH、ALT、AST水平达到平衡,膜稳定性恢复正常;在第3～5天ALB水平稳定于较高水平;HBV复制及表达指标(HBsAg、HBV-DNA)在铺板后1～5天能保持较高水平;酒精对原代肝细胞的氧化应激损伤,浓度<2%时,野生型Balb/c鼠肝细胞损伤程度明显低于HBV-Tg小鼠,浓度≥2%时,两种鼠肝细胞的损伤程度相当.结论 复制型HBV-Tg小鼠原代肝细胞培养可以在体外稳定维持肝细胞活性与功能,表达高水平的HBV-DNA和HBsAg,为体外研究乙型肝炎病毒发病机制提供新的模型.
关键词：乙型肝炎病毒活性氧簇酒精细胞模型原代肝细胞
分类号：R329.2(人体形态学)
资助基金：国家科技重大专项(2008ZX10002-011)
论文发表日期：2011-03-02
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 97-100 )
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