B7-1转基因细胞株的表达和检测
刘岩
王科亮
杨德军
1.哈尔滨医科大学第四临床医学院泌尿外科,黑龙江哈尔滨,1500012.哈尔滨医科大学第四临床医学院泌尿外科,黑龙江哈尔滨,1500013.哈尔滨医科大学第四临床医学院泌尿外科,黑龙江哈尔滨,150001
摘要：目的 构建B7-1基因真核表达载体并导入CAK-1肾癌细胞表达,为进一步研究基因的功能做材料准备.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法,以正常肝脏组织cDNA为模板,扩增B7-1基因全长读码框架,并构建到真核表达载体pCDNA3.1中,将其导入CAK-1肾细胞瘤细胞,对转染后的细胞进行RT-PCR和Western blot分析.结果 克隆测序结果证实,B7-1读码框架被成功插入真核表达载体pCDNA3.1的相应位点,与pCDNA3空载体转染对照细胞相比,pCDNA3-B-7载体转染的CAK-1细胞中B-7基因mRNA平和蛋白水平均有明显升高.结论 B7-1转基因细胞株的成功构建和检测,为深入研究B7-1蛋白的生物学功能奠定了材料基础.
关键词：B7-1转基因表达载体
分类号：R394.21(医学遗传学)
资助基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目(11531223)
论文发表日期：2011-03-02
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 101-103,118 )
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