MiRNA-29调控B细胞转位基因2在肝癌细胞X线照射中的作用研究
魏磊1
张志敏2
李琼3
毛必静3
罗佳3
王阁3
1.解放军武汉总医院保健科, 湖北武汉,4300702.解放军武汉总医院肿瘤科3.第三军医大学大坪医院肿瘤中心
摘要：目的 探讨miRNA-29调控B细胞转位基因2(B cell translcoation gene2,BTG2)表达并初步研究二者在肝癌细胞X线照射后的作用.方法 利用miRNA芯片技术寻找肝癌HepG2与正常肝LO2细胞之间miRNAs表达差异;生物信息学软件预测靶向结合BTG2的人miRNAs;构建miRNA-29a/b/c的miRNA模拟物和miRNA抑制物,分别转染293细胞和HepG2细胞,逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测BTG2在两种细胞中的表达;在HepG2细胞中,给予2、4、8、16Gy剂量X线照射细胞48h后,实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测miRNA-29表达,Western blot检测BTG2表达.结果 利用miRNA芯片技术发现与正常肝LO2细胞相比,miRNAs在HepG2细胞中表达有显著差异,其中66个上调和88个下调,miRNA-29在HepG2细胞中表达显著低于LO2细胞;生物信息学预测发现BTG2基因可能是miRNA-29的靶基因;miRNA-29模拟物分别转染293细胞和HepG2细胞后,BTG2表达降低,而miRNA-29抑制物分别转染细胞后,BTG2表达增加;在HepG2细胞中,给予2、4、8、16Gy剂量照射细胞48h后,miRNA-29随照射剂量增加表达降低,其中16Gy照射组miRNA-29表达较未照射组(对照组)显著降低(P<0.05);BTG2表达与之相反,其表达随照射剂量增加而增高,其中16Gy照射组BTG2表达较未照射组显著性增高(P<0.05).结论 高剂量X线照射肝癌细胞后miRNA-29与BTG2表达相反,BTG2可能是miRNA-29调控直接靶基因.
关键词：肝细胞肝癌逆转录聚合酶链式反应转染X线
分类号：R735.7(消化系肿瘤)R33(人体生理学)
资助基金：国家自然科学基金(81301631)中国博士后科学基金(2014T70977)重庆市博士后科研特别资助项目(Xm201350)重庆市自然科学基金(cstc2013jjB10014)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 219-224,235 )
英文信息